鸡胚接种的方法

鸡胚接种的方法

鸡胚接种是一种常用的实验方法，主要用于研究病毒感染和疫苗研发。以下是鸡胚接种的一般步骤和不同接种方法的具体操作：

一般步骤

准备工作

确保实验室卫生条件良好，并进行必要的消毒处理。

准备所需材料，包括受精鸡蛋、病毒样品或疫苗、适当的培养基等。

取出鸡蛋

使用无菌器具将鸡蛋从孵化器中取出。

用消毒剂擦拭鸡蛋表面，确保表面无菌。

制备操作区域

在实验室台面上准备一个无菌操作区域。

使用无菌器具将所需工具（如注射器、刀片）摆放在操作区域上。

接种操作

在无菌操作区域上，使用无菌器具在鸡蛋的空气室区域确定一个合适的接种点。

使用无菌注射器将病毒样品或疫苗注入鸡蛋内，注意避免对鸡蛋内的胚胎造成机械损伤。

封蛋

使用无菌聚乙烯封膜或其它适当的封蛋材料将接种点封住，以防止污染和脱水。

不同接种方法

1. 卵黄囊接种法

将卵横放在卵座上，胚胎位置向下。

在卵长径的1/2处用碘酊和酒精消毒。

用钢锥打一小孔，将针头刺入约1.5cm，注入病毒液0.1-0.5ml。

用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内继续孵育，24小时内死亡者废弃。

2. 绒毛尿囊膜接种

在胚胎附近近气室处，选择血管较少的部位，用电烙器在卵壳上烙一个直径约3-4mm的烤焦圈。

用碘酊和酒精消毒后，小心用刀尖撬起卵壳，造成卵窗。

在气室端中央钻一个小孔。

用针尖挑破卵窗中心的壳膜，切勿损伤其下的绒毛尿囊膜，滴加生理盐水于刺破处。

用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气，造成气室内负压，使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室，此时可见滴于壳膜上的生理盐水迅速渗入。

用1ml注射器滴2-3滴接种物于绒毛尿囊膜上。

用透明胶纸封住卵窗，或用玻璃纸盖于卵窗中，周围涂上熔化的石蜡密封，气室中央的小孔用石蜡密封。

胚横卧于卵箱中，不许翻动，保持卵窗向上。置孵卵箱中孵育，每天翻卵并检卵一次，24小时内死亡者废弃。

3. 尿囊腔接种

选用10-11日龄的鸡胚，画出气室和胚位。

在气室接近胚体处用碘酊和酒精进行消毒。

用钢锥穿一小孔。

将注射器沿小孔插入0.5-1.0cm，注入0.1-0.2ml接种物。

用石蜡封口，并置孵卵箱中孵育，每天翻卵并检卵一次，24小时内死亡者废弃。

4. 羊膜腔接种

鸡胚接种技术涉及解剖与收获，具体步骤包括：

将孵育10~13日龄鸡胚标识气室、胎位。

于与胚胎略近气室端卵壳上划一等边三角形。

消毒气室顶端及记号处，用开孔器在记号处卵壳上开一三角形裂痕，不可弄破下面壳膜，同时在气室顶端钻一小孔。

轻轻揭去卵壳，露出壳膜，在壳膜上滴一滴生理盐水，用针尖循卵壳膜纤维方向划破一隙，勿伤及紧贴绒毛尿囊膜。

通过裂痕将针头插入羊膜腔，注入病毒液或疫苗。

用石蜡封口，并置孵卵箱中孵育，33~35℃孵卵器孵育48~72小时，于接种后24小时内死亡者为非特异性死胚应弃去。

建议

在进行鸡胚接种时，应严格遵守无菌操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。

根据实验目的选择合适的接种方法