计算酵母菌数量的方法
计算酵母菌数量的方法主要有以下几种:
显微镜直接计数法
操作方法:将含有酵母菌的溶液制成悬液,取一定量涂于计数板上,在显微镜下直接计数。对于压在小方格界线上的酵母菌,应只计相邻两边及其顶角的个体数。通常选择计数板上的5个中方格(即400个小方格)进行计数。
计算公式:每小格中酵母菌数 = 5个中方格内酵母菌总数 / (5×25×16)。
血球计数板计数法
操作方法:将含有酵母菌的溶液按一定比例进行稀释,置于显微镜下观察并计数,按稀释比例计算酵母菌总数量。血球计数板有16格×25格和25格×16格两种规格,使用时应选择合适的计数室,并确保计数室内无残留物。
计算公式:
对于16格×25格的血球计数板:酵母细胞数/ml = 100个小格内酵母细胞个数 / (100×400×10^4)×稀释倍数。
对于25格×16格的血球计数板:酵母细胞数/ml = 80个小格内酵母细胞个数 / (80×400×10^4)×稀释倍数。
平板菌落计数法
操作方法:将待测样品经过适当稀释后,均匀分布在培养基表面,经培养后形成肉眼可见的菌落。根据菌落数来推算样品中的酵母菌含量。通常选择适当的稀释度,吸取一定量样品加入平板,培养后计数菌落数。
计算公式:每克(或每毫升)样品中的菌落数 = 平板上菌落平均数 × 稀释倍数。
比浊法
操作方法:利用酵母菌悬液的透光率与酵母菌浓度的正比关系,通过测定透光率来推算酵母菌含量。将待测样品与标准酵母菌悬液进行比较,根据透光率的差异来推算样品中的酵母菌含量。
计算公式:样品中酵母菌浓度(个/mL) = (A1 - A2) / (A0 - A2) × C0,其中A1为待测样品的透光率,A2为空白对照的透光率,A0为标准酵母菌悬液的透光率,C0为标准酵母菌悬液的浓度。
建议
选择合适的方法:根据酵母菌数量的多少选择合适的方法。对于数量较少的情况,显微镜直接计数法较为简便;对于数量较多的情况,血球计数板计数法更为高效。
注意操作细节:在操作过程中,要确保计数板的清洁,避免杂质干扰计数结果。同时,稀释过程中要保证均匀混合,确保每个样品的代表性。
多次重复:为了提高计数的准确性,可以对同一样品进行多次计数,取平均值。
